沒食子酸，別名3，4，5-三羥基苯甲酸、五倍子酸；棓酸、沒食子酸（無水）；在制藥，墨水，染料，食品，輕工和有機合成等方面有許多用途.沒食子酸與三價鐵離子生成藍黑色沉淀，是藍黑墨水的原料；工業(yè)上也用于制革；還可做照相顯影劑.沒食子酸丙酯為抗氧劑，可用于食用油脂以防腐臭變質.在醫(yī)藥上沒食子酸是止血收斂劑，也是溫和的局部刺激劑.
目的建立沒食子中沒食子酸的含量測定方法.方法采用液相色譜法測定沒食子酸的含量，色譜柱為Waters Symme @Cl8柱(5μm，4.6mm×150mm)；流動相為甲醇一0.05％磷酸溶液(5：95)；流速0.8 ml/min ；檢測波長273Bill.結果沒食子酸進樣量在0.0506～0.4060μg范圍內線性關系良好，平均加樣回收率為98.99％，RSD：1.5％.結論所用方法簡便、快速、準確.
采用HPLC測定沒食子中沒食子酸的含量.
1、實驗部分
1.1 儀器與試藥：高效液相色譜儀包括Waters Delta 6OO泵，waters 2996PDA檢測器(美國Waters公司).沒食子藥材(新疆維吾爾自治區(qū)藥品檢驗所鑒定)；沒食子酸對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號：0831—9501)；甲醇(色譜純)；磷酸(分析純)；水為重蒸水.
1.2 色譜條件
色譜柱為Waters SymmetryCl8(5μm，4.6mm×150mm)；流動相為甲醇一0.05％磷酸溶液(5：95)；檢測波長273nm；流速0.8 ml/min ；柱溫25℃.
1.3 方法與結果
1.3.1 溶液的制備：精密稱取沒食子粗粉1 g，置50 m1量瓶中，加甲醇30 m1，超聲提取1 h，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液lm1，甲醇定容至l0 m1量瓶中，搖勻，作為供試品溶液.精密稱取干燥至恒重的沒食子酸對照品2.55mg，置50m1量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，得對照品溶液.
1.3.2 線性范圍的考察：精密吸取沒食子酸對照品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 ml于5個l0m1量瓶中，分別加甲醇至刻度，搖勻，各吸取l0 l注入高效液相色譜儀，以進樣量(g)為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線，回歸，得線性方程為：A=1.468×lO6C-1.739×lO4(r=0.9997).結果表明，沒食子酸在0.0506 0.4O60／_tg范圍內，具有良好的線性關系.
1.3.3 精密度試驗：在“1.2.1”項條件下，精密吸取沒食子酸對照品溶液10μl，連續(xù)進樣6次，峰面積的RSD=1.3％，表明儀器精密度良好.
1.3.4 穩(wěn)定性實驗：取室溫下放置的樣品溶液，在20 h內進樣6次，其峰面積的RSD=2.4％，表明樣品溶液在室溫下20 h穩(wěn)定.
1.3.5方法精密度(重復性)試驗：精密稱取沒食子藥材1g，按“1.3.1”項下方法制備6份供試品溶液，分別測定沒食子酸的含量，RSD=3.8％，證明此方法精密度良好.
1.3.6 加樣回收率試驗：精密稱取已知含量的沒食子樣品細粉，分別加入沒食子酸對照品。
1.3.7 樣品的測定：精密稱取沒食子藥材1g，按“1.3.1”項下方法制備供試品溶液，經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)過濾，取續(xù)濾液l0l進樣，同時進l0μl對照品溶液，進樣5次，用峰面積按外標法計算，得沒食子酸的平均含量31.65 mg/g，RSD=0.98％(n=5).
2、討論
沒食子中主要含有可水解的鞣質，加熱提取會水解成沒食子酸，因此，樣品選用超聲提取的方法.曾分別超聲0.5、1.0、1.5、2.0 h，結果顯示，1.0h已經(jīng)提取完全.文中方法用于沒食子中沒食子酸的含量測定，操作簡便，結果準確.
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