采用UPC2/MS簡單快速地分析游離脂肪酸Giorgis Isaac,1Michael D. Jones,1Besnik Bajrami,1Wassim Obeid,2James Langridge,3Patrick Hatcher2 1沃特世公司(美國馬薩諸塞州米爾福德)2歐道明大學(xué)(美國弗吉尼亞州諾?？?3沃特世公司(英國曼徹斯特)
應(yīng)用優(yōu)勢 ■展示根據(jù)鏈長和雙鍵數(shù)量分離多種游離脂肪酸(FFA)■無需衍生化，可實(shí)現(xiàn)更簡單快速的樣品制備，避免干擾■有機(jī)溶劑提取物可直接進(jìn)樣至系統(tǒng)中，節(jié)省了每次分析的時(shí)間和成本■三分鐘內(nèi)即可完成色譜分離，速度比GC/MS快10倍■與GC/MS不同，借助UPC22®可以輕松分析低揮發(fā)性的極長鏈脂肪酸(>24個(gè)碳原子) 沃特世解決方案ACQUITY UPC2TM 系統(tǒng)TransOmics™ 信息學(xué)軟件Xevo® G2 QTof 質(zhì)譜儀 ACQUITY UPC2 HSS 色譜柱 簡介
游離脂肪酸和構(gòu)成復(fù)合脂質(zhì)的脂肪酸都在代謝中發(fā)揮著一些關(guān)鍵作用--作為主要的代謝燃料(儲存和運(yùn)輸能量)、所有細(xì)胞膜必不可少的成分和基因調(diào)控因子。此外，膳食中的脂質(zhì)可提供多不飽和脂肪酸，這類脂肪酸是功能強(qiáng)大的局部作用代謝產(chǎn)物(如類花生酸)的前體。常見的動植物來源脂肪酸均為偶數(shù)鏈，每條鏈含16至24個(gè)碳原子，并具有0到6個(gè)雙鍵。但是大自然中總有著無數(shù)的例外，實(shí)際上甚至還存在多達(dá)近100個(gè)碳原子的奇數(shù)碳和偶數(shù)碳脂肪酸。此外，雙鍵可以為順式(Z)和反式(E)構(gòu)型，也可以具有各種其它結(jié)構(gòu)特征，包括分支點(diǎn)、環(huán)、含氧官能團(tuán)等等。脂肪酸鏈可以在特定的位點(diǎn)含有一個(gè)或多個(gè)雙鍵(具有順式(Z)或反式(E)構(gòu)型的不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸)，也可以是完全飽和的。LIPIDMAPS脂肪酸系統(tǒng)命名法用“?”指示雙鍵相對于羧基的位置1。脂肪酸結(jié)構(gòu)在分子的一端(指定為Omega，ω)含有一個(gè)甲基，另一端為羧基?？拷然奶荚臃Q為α碳，緊接著下一個(gè)碳原子則稱為β碳。通常，還會使用字母“n”代替ω，以指示離甲基端最近的雙鍵位置2。圖1展示了不同直鏈脂肪酸的結(jié)構(gòu)。
從生物材料中分離游離脂肪酸(FFA)是一項(xiàng)復(fù)雜的工作，必須隨時(shí)注意防止或盡量減少水解酶的影響。完成分離后，可通過典型的色譜方法對脂肪酸進(jìn)行分析，包括氣相色譜/質(zhì)譜法(GC/MS)和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC/MS/MS)。但是，這些方法都有著各自的不足之處。 例如，GC法需要將脂肪酸進(jìn)行衍生化，以便水解并轉(zhuǎn)化為甲酯，這一過程不僅耗時(shí)，而且在衍生化過程中還存在脂肪酸重排的風(fēng)險(xiǎn)，使得無法確定形成的酯是來自FFA還是完整的復(fù)合脂質(zhì)。此外，對于具有高分子量(>C24)的低揮發(fā)性極長鏈脂肪酸來說，即使在脂肪酸甲酯(FAME)衍生化后，其GC/MS分析依然存在問題。 本文介紹的UPC2/MS FFA分析是一種簡便快速的方法，與其它諸如GC/MS等需要進(jìn)行FAME衍生化的技術(shù)相比，可顯著縮短分析時(shí)間。此外，含有脂質(zhì)的有機(jī)層提取物可以直接進(jìn)樣至系統(tǒng)中，無需溶劑交換即可兼容反相LC方法。
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