生物SEM觀察研究組織的表征,與TEM觀察組織超薄切片相輔佐。
組織SEM取材方法與TEM類似,不同的是:要保護好組織的被觀察表面、對這個面的識別和無損傷清潔。
具體操作中,應做到以下五點:
?首先必須定位準確,要使對照組和實驗組保持取材位點和方向一致;
?確認并保護好被觀察面的精細結構,做好標記;
?修整樣品塊,標準樣品塊尺寸約3~5mm3,太大了會影響固定、脫水、干燥及鍍膜效果;修整樣品塊的操作應避免金屬器材牽拉、按壓等損傷;
?用緩沖液沖洗被觀察表面污物2~3次,充分暴露表面精細結構;對腸粘膜上皮細胞、呼吸道上皮細胞等附著粘液應選擇合適的物理或化學清潔方法(見微亞技術咨詢);
?取材操作迅速,離體后盡快浸入醛類固定液,減少組織細胞自容。對于實驗動物做灌注固定再取材更好。
完成取材之后,盡快送實驗室進入制備程序。
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